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原代細胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

更新時間:2025-04-24

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用戶真實反饋:科研大咖的“真香"體驗

“CD3被敲低了80%多!你們這試劑的確有點東西!我做原代的,每次都得敲,以后我要長期回購!"

原代細胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

這條來自一線科研人的反饋,印證了ProteanFect CRISPRMax的硬核實力。無論是基因敲除、點突變還是大片段插入,這款試劑盒均能穩定輸出高效結果。


今天,我們為您帶來一款革命性產品——ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯轉染試劑盒。它憑借非病毒非電轉非脂質體的獨·特技術,輕松實現原代細胞80%以上的基因編輯效率,成為國內外實驗室的“明星工具"!


產品核心優勢:為何選擇ProteanFect CRISPRMax?

1. 專為原代與難轉細胞設計,效率突破瓶頸

原代細胞轉染效率高達80%+:用戶實測數據顯示,人原代Treg細胞中CD3基因敲低效率超過80%,與說明書中的流式數據(86% CD3陰性率)高度一致。

難轉細胞系的救星:無論是懸浮細胞還是貼壁細胞,均能穩定遞送Cas9 mRNA和sgRNA,共表達率超90%。

2. 安全無憂:非病毒、無毒性、零殘留

基于自組裝蛋白納米顆粒技術,無需病毒載體或脂質體,避免基因組整合風險,顯著降低細胞毒性。

轉染后細胞活力恢復快,第二天即可正常培養,實驗周期大幅縮短。

3. 操作極簡,節省成本

預混試劑+明確步驟:只需按表配置Reagent A/B/C,孵育后即可完成轉染。

無需耗費高成本構建基因敲除鼠,直接實現T細胞穩定基因高效敲除。

技術揭秘:蛋白納米顆粒如何實現高效遞送?

ProteanFect CRISPRMax的核心在于其自組裝蛋白納米顆粒技術:

高效負載:帶正電的納米顆粒通過靜電作用吸附Cas9 mRNA和sgRNA,形成穩定復合物。

精準遞送:復合物通過內吞作用進入細胞后,迅速釋放核酸,避免溶酶體降解。

安全釋放:無需依賴病毒或脂質體的膜融合機制,減少細胞損傷。


實驗驗證:

靶向人TRAC基因的sgRNA轉染原代T細胞后,TIDE測序顯示編輯效率達88.5%,與流式結果高度吻合。

EGFP mRNA共轉染陽性率超90%,輕松監控轉染效果。

數據分享:高效基因編輯,從ProteanFect開始

使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉染試劑盒轉染人原代 T 細胞,使用試劑盒中的 human TRAC-sgRNA 陽性對照敲除 TRAC 基因。在轉染 72 小時后,收集細胞,在蛋白水平(圖 1)和 DNA 水平(圖 2)檢測基因敲除的效率。

原代細胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

圖 1. 使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉染試劑盒編輯人原代 T 細胞中 TRAC基因后,TCR 蛋白表達的流式檢測結果。流式結果顯示,陽性對照組中約 86%的 T 細胞為 CD3陰性,表明該試劑盒同時遞送 Cas9 mRNA/sgRNA,總細胞群中約有 86%細胞的 TRAC 基因被成功編輯。

原代細胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

圖 2.使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉染試劑盒編輯人原代 T 細胞中 TRAC 基因的測序分析結果。收集轉染后的總細胞提取基因組 DNA,對靶點位置 PCR 擴增(正向引物序列:GCAGTATTATTAAGTAGCCCT,反向引物序列:AACAAGGCTCACTGTTTCTT)并進行Sanger 測序,通過 TIDE 對測序結果進行分析,結果顯示陽性對照組中靶點基因被編輯的比例約為 88.5%,與流式檢測蛋白水平的敲除結果(CD3-TCR 流式陰性比例)相當。


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