99久久国语露脸精品对白-99久久精品6在线播放-99久久精品费精品国产一区二区-99久久精品国产麻豆-99久久精品国产一区二区小说

客戶咨詢熱線:
15021010459
首頁 > 技術文章 > 常見細胞轉染技術及原理

常見細胞轉染技術及原理

更新時間:2021-12-02

閱讀:2698

常見細胞轉染技術及原理


常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。后者也稱穩定轉染,外源DNA 既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性 DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小,大約1/104轉染細胞能整合,通常需要通過一些選擇性標記,如來氨丙基轉移酶

今天小編帶大家了解一下不同細胞轉染技術的原理:

QQ截圖20211202105024.png

除上述傳統方法外,近年來國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術,以其適用宿主范圍廣,操作簡便對細胞毒性小,轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物(Dendrimers)和聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的轉染性能最佳,但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性,且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體。這種聚陽離子能將各種報告基因轉入各種種屬細胞,其效果好于脂質聚酰胺,經進一步的改性后,其轉染性能好于樹枝狀聚合物,而且它的細胞毒性低。大量實驗證明,PEI是非常有希望的基因治療載體。目前在設計更復雜的基因載體時,PEI經常做為核心組成成分。

線型.PEI(Line PEI,LPEI)與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI(Branched PEI,BPEI)要早一些,過去的研究認為在不考慮具體條件,LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低,有利于細胞定位,因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成小的轉染復合物,從而提高轉染效率,但同時細胞毒性也增大。超高分枝的、較柔性的PEI衍生物含有額外的仲胺基和叔胺基,在染實驗中發現這種PEI的毒性低,但轉染效率卻較高。


主站蜘蛛池模板: 久久久久一级片| 亚洲国产午夜| 神马啪啪| 邪恶亚洲| 91精品久久国产青草| 成人福利免费视频| 性视屏| 精品视频vs精品视频| 66j8免费视频| 中文字幕在线播| 欧美一级特黄特黄做受| 黄在线观看| 国产一区二区三区在线免费观看| 亚洲网在线观看| 日本一级爽快片淫片高清| 亚洲精品日韩专区silk| 欧美日韩一区二区视频免费看| 美国a级| 精品一区二区三区视频在线观看免| 四月色| 亚洲国产成人精品区| 欧美一级中文字幕| 国产不卡免费| 国产高清一级毛片在线不卡| 香蕉视频黄网站| 国产精品成人免费视频| 日韩欧美91| 91香蕉国产线在线观看免费| 上海毛片| 久久精品国产一区二区| 亚洲国产成人久久一区www妖精| 免费网站看v片在线观看| 欧美黄色一级视频| 国产一级黄色录像| 美女黄色一级毛片| 啪啪国产视频| 麻豆91精品91久久久| 精品一区二区久久久久久久网精| www.91视频.com| 二区国产| 国产三级网址|