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教您分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣

更新時(shí)間:2021-11-23

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   市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。本人根據(jù)十多年來(lái)血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗(yàn),總結(jié)如下:
  一、外觀
  拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀,對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō),外觀的判斷尤為重要
  1、顏色
  根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/d,實(shí)際上, 血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的游血。國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散。大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會(huì)有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色。 當(dāng)然,國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛業(yè)消。進(jìn)口胎牛血消或多或少總有點(diǎn)浴血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂。總的來(lái)說(shuō)。 國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量*好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,如SERANA   S-FBS-US-015. 差點(diǎn)的呈現(xiàn)出硫紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱天活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹?由于血紅蛋白的破壞氧化, 會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
  2、沉癥
  很多血清客戶, 會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)門血清有沉視, 從面懷疑血請(qǐng)的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉定是由纖維蛋白的凝鑒產(chǎn) 對(duì)面清動(dòng)量沒(méi)有任何影明。 沉浪的產(chǎn)生原因很多。 家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
  進(jìn)口的胎牛血清,過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清激的,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾獨(dú),甚至有大量沉淀。當(dāng)然,購(gòu)買回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過(guò)程*好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對(duì)較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
  3、澄清度
  進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國(guó)產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深,這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,可容易分辨。
  胎牛血清注意事項(xiàng):
  1. 血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時(shí)間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
  2. 血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請(qǐng)按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
  3.無(wú)血清培養(yǎng)基:無(wú)血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,血清仍然是培養(yǎng)液中最基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培養(yǎng)液。
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