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類器官原代培養全流程

更新時間:2024-01-03

閱讀:1104

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類器官原代培養全流程

實驗前準備

CO2 培養箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機、水浴鍋、水浴搖床,醫用冰箱、-80°冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科鑷。

試劑:小腸類器官培養基,小腸類器官消化液,小腸組織保存液,小腸類器官緩沖液,硫酸慶大霉素,雙抗,組織固定液,基質膠,60mm細胞培養皿, 100μm濾篩,15ml離心管,1.5ml EP管若干,4度冰盒,眼科剪刀,眼科鑷。

實驗流程

(1)樣本準備:

     將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中,4℃從醫院/實驗室取回。
     將取樣瓶消毒,組織取出放入培養皿樣本拍照,并登記,大小,顏色,軟硬程度,組織類型等信息。
(2)清洗,剪碎:
     添加含有雙抗、慶大霉素的類器官緩沖液浸泡,用眼科鑷刮去腸道粘膜,腸絨毛等。在培養皿中用類器官緩沖液清洗三次(每次更換培養皿)后剪碎,剪成大約1mm3的組織塊。靜置2次。
(3)消化-過濾:

    用組織消化液在37℃進行消化10-15min(消化過程中隨時觀察消化情況)。

    類器官緩沖液終止消化,用槍頭輕柔吹打可以看到液體變渾濁。

   使用100μm孔徑的篩網進行過濾,取少量濾液在鏡下進行觀察,可以看到明顯的隱窩狀組織結構。

4)離心、加膠 

(5)鋪板

(6)觀察


歐瑪生物類器官培養基系列,華雅均有現貨,歡迎咨詢

產品                 貨號        名稱(英文)

結直腸癌類器官培養基 OM11 (Human) Colorectal Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人結腸類器官培養基     OM11N (Human) Colorectal Organoid Culture Medium 100ml

胃癌類器官培養基     OM12 (Human) Gastric Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胃類器官培養基     OM12N (Human) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

肺癌類器官培養基     OM13 (Human) Lung Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肺類器官培養基     OM13N (Human) Lung Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺癌類器官培養基 OM14 (Human) Pancreatic Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人胰腺類器官培養基     OM14N (Human) Pancreatic  Organoid Culture Medium 100ml

肝癌類器官培養基     OM15 (Human) Liver Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人肝臟類器官培養基     OM15N (Human) Liver Organoid Culture Medium 100ml

宮頸癌類器官培養基     OM16 (Human) Cervical Cancer Organoid Culture Medium 100ml

人宮頸類器官培養基     OM16N (Human) Cervical Organoid Culture Medium 100ml

食管鱗癌類器官培養基 OM17 (Human) Esophageal Squamous Cancer Organoid Culture Medium 100ml

乳腺癌類器官培養基     OM18 (Human) Breast Cancer Organoid Culture Medium 100ml

膀胱癌類器官培養基     OM19 (Human) Bladder Cancer Organoid Culture Medium 100ml

小鼠小腸類器官培養基 OM31 (Mouse) Small Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠大腸類器官培養基 OM32 (Mouse)  Large Intestinal Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肝臟類器官培養基 OM33 (Mouse) Liver Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胃類器官培養基     OM34 (Mouse) Gastric Organoid Culture Medium 100ml

小鼠肺類器官培養基     OM35 (Mouse) Lung Organoid Culture Medium 100ml

小鼠子宮類器官培養基 OM36 (Mouse) Uterine Organoid Culture Medium 100ml

小鼠胰腺類器官培養基 OM37 (Mouse) Pancreatic Organoid Culture Medium 100ml

小鼠食管類器官培養基 OM38 (Mouse) Esophageal Organoid Culture Medium 100ml

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