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RNA降解的常見原因,如何防止RNA降解

更新時間:2023-11-01

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RNA降解是一個常見的問題,特別是在進行RNA提取和下游分析時。以下是導致RNA降解的一些常見原因及其相應的解決方案:

  1. 新鮮細胞: 裂解液不足會導致裂解不充分,從而使部分RNA未被釋放出來。為了確保RNA釋放出來,應在裂解過程中加入足夠的裂解液。

  2. 新鮮組織: 若組織中含有內源性核酸酶,則很難避免RNA酶的降解。建議采用的方法是在液氮條件下將組織研磨,并且,在勻漿時采用更多的裂解液。

  3. 冷凍樣品: 如果樣品未經液氮速冷直接轉移到-70℃冰箱存放,會使RNA緩慢降解。為了避免這種情況,應在樣品取材后迅速置于液氮中冷凍存放,然后轉移到-70℃冰箱存放。

  4. 外源RNA酶的污染: 實驗試劑、器械等實驗用品應采用DEPC水滅菌處理,以消除外源RNA酶的污染。

  5. 內源RNA酶的污染: 抑制劑失效或者用量不夠,以及實驗樣品過多或勻漿溫度過高都可能導致內源RNA酶的污染。為了減少內源RNA酶的影響,可適當增加抑制劑的濃度,確保樣品處理時處于適宜的溫度。

  6. 長時間暴露于高溫或光照環境下: RNA容易受到紫外線和高溫的影響而發生降解,因此在實驗過程中應避免樣品暴露于高溫或光照環境下。

  7. 提取過程中的反復冷凍解凍: 這種情況會破壞RNA結構,使其更容易受到酶的作用而降解。因此,在RNA提取過程中應盡量減少冷凍解凍次數,最好一次性完成整個提取過程。


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產品貨號:762165
產品規格:2.5mL,100支/盒

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