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轉染試劑的使用及效果

更新時間:2022-11-21

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   轉染試劑是一種獨特的陽離子脂質配方,適用細胞系種類多,轉染效率高,而且具有很高的蛋白質表達水平或基因沉默或活性 (RNAi)。該產品是出色的轉染試劑,可簡單、高效、優(yōu)質地將核酸轉入多種真核細胞內,而且適用于高通量操作。
  轉染試劑由納米高分子聚合物組成,分子內含有許多氨基,在生理PH下會發(fā)生質子化,這些質子化的氨基可以中和DNA質粒表面的負電荷,使DNA分子由伸展結構壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉染復合物主要是通過細胞內吞作用將DNA轉移進入細胞,形成內含體,DNA從內含體釋放,進入細胞質中,再進一步進入核內轉錄、表達。通過納米技術生產出的轉染試劑在納米尺度表現出結合保護DNA能力強、毒性低的性能。
  轉染試劑的應用:
  將DNA導入哺乳動物細胞和昆蟲細胞。
  同病毒協(xié)同轉染難轉哺乳動物細胞,可顯著增強病毒的轉染效率。
  轉染試劑的使用及效果:
  將2μg無內毒素質粒DNA和4μL本產品分別稀釋到50μL溶液A中,將上述兩溶液混勻,加入到在1mL培養(yǎng)基中生長了18-24小時、覆蓋率達到50-80%的培養(yǎng)細胞中,輕搖以混勻,然后在37℃/5%CO2孵箱中培養(yǎng),24-72小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩(wěn)定細胞系加壓篩選。
  轉染試劑主要用于哺乳動物細胞和昆蟲細胞的瞬時轉染以及穩(wěn)定細胞系構建,可以將轉染實驗操作縮短到一分鐘即可完成。本產品具有下列特點:
  1、本產品和質粒混合后無需室溫靜置孵育,直接轉染。
  2、毒性低,轉染后細胞存活率高。
  3、適合于多種常用的細胞系。
  4、可直接加入含血清的細胞培養(yǎng)基中進行轉染,而且無需在轉染后補加血清和更換超快轉染試劑盒培養(yǎng)基。
  5、如果實驗目的在于篩選抗藥性穩(wěn)定細胞系,可以在細胞傳代后可直接進行轉染實驗,不需轉染前細胞培養(yǎng)時間。
  6、無需在轉然后4-6小時補加血清或更換培養(yǎng)基。
 
 
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